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用冷光源培養(yǎng)箱培養(yǎng)擬南芥

更新時(shí)間:2019-09-18      點(diǎn)擊次數(shù):1690

擬南芥作為高等植物的模式生物被*的植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室廣泛研究。芥培養(yǎng)可用于基因表達(dá)、器官發(fā)育、基因突變等研究。然而,怎么培養(yǎng)好這種小植物可能不是那么容易。

1、首先把擬南芥種子放到濾紙上,用70%酒精進(jìn)行消毒處理,再用*進(jìn)行處理(也可選擇20%漂白劑以及0.05% Triton X-100 非離子表面活性劑做殺菌處理20分鐘)。用無(wú)菌水沖洗5遍,然后將種子點(diǎn)到MS培養(yǎng)基上,pH5.9,另加0.9%瓊脂以及2%蔗糖。


2、把種子放到冷光源培養(yǎng)箱中,設(shè)置4℃黑暗條件下進(jìn)行春化48h-72h左右,在長(zhǎng)日照或短日照條件下催芽。利用PLC控制器,編輯簡(jiǎn)單的晝夜模式,設(shè)定光照時(shí)間16小時(shí)(黑暗8小時(shí))或者光照14小時(shí)(黑暗10小時(shí));選配Q23+連續(xù)光強(qiáng)調(diào)節(jié)裝置,設(shè)定光照強(qiáng)度為100-150umol/m2.s;設(shè)定室內(nèi)溫度為光照條件下20-22℃,黑暗條件下18-20℃;選配濕度控制系統(tǒng),設(shè)定室內(nèi)相對(duì)濕度70%。


3、出苗大約7~10天,然后移入土中培養(yǎng),采用底部灌溉方式澆水(利用土壤的毛細(xì)作用)。在*次澆水前,可使土壤*干燥,以后每隔7~10天澆一次水。


4、土壤可用營(yíng)養(yǎng)土、蛭石以及珍珠巖比例10:1:1的比例配置,也可直接用堆肥、蛭石以及草炭等進(jìn)行混合。在生長(zhǎng)過(guò)程中,可用普通的花肥施肥一次或者不施肥。


5、當(dāng)植株長(zhǎng)到一定高度時(shí),可剪斷莖桿,以產(chǎn)生更多的花序,可用于轉(zhuǎn)化研究或者獲得更多的種子

擬南芥培養(yǎng)箱特殊培養(yǎng)
為了加快擬南芥生長(zhǎng)速度,在移入土壤培養(yǎng)后,可設(shè)定長(zhǎng)日照,利用PLC控制器,編輯程序設(shè)定24h光照,光強(qiáng)100-250umol/m2.s,溫度持續(xù)22-23℃。
擬南芥根系處理培養(yǎng),可減少光照時(shí)間為8-12h,提高光照強(qiáng)度為100-350umol/m2.s,溫度為光照條件下22-23℃,黑暗條件下18-20℃,其余培養(yǎng)條件同正常培養(yǎng)。

 

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